Jaký je účel primární protilátky v testu Western blot?
Jaký je účel primární protilátky v testu Western blot?

Video: Jaký je účel primární protilátky v testu Western blot?

Video: Jaký je účel primární protilátky v testu Western blot?
Video: Sérologická vyšetření – co nám přinášejí a jaké mají nedostatky 2024, Červenec
Anonim

Metoda přímé detekce, konjugovaná s enzymem nebo fluoroforem primární protilátka se používá k detekci požadovaného antigenu na skvrna . V metodě nepřímé detekce neoznačený primární protilátka se poprvé používá k navázání antigenu.

Kromě toho, co je primární protilátka ve Western blotu?

The primární protilátka rozpoznává a váže epitop nebo specifickou aminokyselinovou sekvenci požadovaného proteinu. Sekundární protilátky používá western blot jsou typicky konjugovány s enzymem; nejčastěji používanými enzymy jsou peroxidáza z ředkvičky (HRP) a alkalická fosfatáza (AP).

Navíc, co dělá primární protilátka? Primární protilátky jsou imunoglobuliny, které se vážou na specifický antigen ( protein (peptid, malá molekula atd.), které jsou předmětem zájmu, a jsou typicky nekonjugované. Dobrá primární protilátka rozpoznává a váže se s vysokou afinitou a specificitou k purifikaci, detekci a měření antigenu.

Jaký je tedy účel Western blotu?

A western blot je laboratorní metoda používaná k detekci specifických proteinových molekul ze směsi proteinů. Molekuly proteinu jsou poté separovány podle jejich velikosti pomocí metody zvané gelová elektroforéza. Po separaci jsou proteiny přeneseny z gelu na a blotování membrána.

Jak se používají protilátky při Western blotu?

Protilátky jsou použitý k detekci cílových proteinů na western blot (imunoblot). The protilátky jsou konjugovány s fluorescenčními nebo radioaktivními značkami nebo enzymy, které poskytují následnou reakci s aplikovaným činidlem, což vede k zabarvení nebo emisi světla, což umožňuje detekci.

Doporučuje: